Исследование высокоинформативных ДНК-маркеров для диагностики числовых аномалий хромосом человека

Т.В. Осадчук, К.А. Моссэ ГУ «Республиканский научно-практический центр «Мать и дитя»»

2012 №1 | Оригинальные научные публикации

Аннотация

Список литературы

Числовые аномалии хромосом человека (анеуплоидии) являются самой частой причиной врожденной патологии человека. Частота трисомии хромосомы 21 (синдром Дауна) составляет в Беларуси 1:780. Одним из эффективных подходов диагностики анеуплоидий является метод количественной флуоресцентной ПЦР. Отобраны и протестированы наиболее информативные ДНК-маркеры хромосом 13, 18, 21 и Х. Разработан метод ДНК-диагностики наиболее частых анеуплоидий с использованием мультиплексной ПЦР и автоматического капиллярного электрофореза на основе одновременного тестирования 15 микросателлитных маркеров хромосом 13, 18, 21, X, Y в ходе одного анализа. Результат ДНК-диагностики числовых аномалий хромосом при применении технологии флуоресцентной количественной ПЦР может быть получен менее чем через 6 часов после выполнения биопсии или амниоцентеза.

Ключевые слова:

анеуплоидия, числовые аномалии хромосом человека, флуоресцентная количественная ПЦР, пренатальная диагностика

The research of highly informative DNA-markers for diagnostics of human chromosomes numerical abnormalities

Numerical abnormalities of human chromosomes (aneuploidies) are the most frequent cause of congenital human pathology. The frequency of chromosome 21 trisomy (Down syndrome) constitutes 1:780 in Belarus. One of the most effective strategies for molecular diagnostics of aneuploidies is based on quantitative PCR analysis. We selected and tested the most informative DNA-markers of chromosomes 13, 18, 21 and X.On the basis of current molecular genetic technologies there has been developed a method of DNA diagnostics of the most frequent aneuploidies using multiplex PCR and automated capillary electrophoresis based on the simultaneous testing of 15 microsatellite markers of chromosomes 13, 18, 21, X, Y in a single analysis. Results of DNA diagnostics of human chromosomes numerical abnormalities using fluorescent quantitative PCR technology can be obtained in less than 6 hours.

Keywords

aneuploidy, numerical abnormalities of human chromosomes, fluorescent quantitative PCR, prenatal diagnosis

1. Антоненко, В. Г. Рекомендации по обеспечению качества и надежности цитогенетических исследований. Европейские стандарты для цитогенетических исследований конституциональных и приобретенных хромосомных аномалий / В. Г. Антоненко, И. Г. Лильп // Мед. генетика. – 2008. – №. 3. – С. 13 – 33.
2. Баранов, В. С. Цитогенетика эмбрионального развития человека / В. С. Баранов, Т. В. Кузнецова. Ст¬Петербург, издательство Н – Л 2007. – С. 370 – 371.
3. Зацепин, И. О. Аутосомные трисомии у потомков облученных родителей на примере синдрома Дауна: автореф. дисс. …канд. биол. наук. / И. О. Зацепин. Мн., 2004. – 21 с.
4. Никитина, В. А. Молекулярно¬генетические методы пренатальной диагностики анеуплоидий / В. А. Никитина, Е. Ю. Воскобоева, Е. А. Калашникова // Российский вестник акушера¬гинеколога. – 2009. – №. 5. – С. 35 – 38.
5. Dudarewicz, L. [et al.] Molecular methods for rapid detection of aneuploidy / L. Dudarewicz [et al.] // J. Appl. Genet. – 2005. – Vol. 46, № 2. – P. 207 – 215.
6. Mansfield, E. S. Diagnosis of Down syndrome and other aneuploidies using quantitative polymerase chain reaction and small tandem repeat polymorphisms / E. S. Mansfield // Hum. Mol. Genet. – 1993. – Vol. 2. – P. 43 – 50.
7. Pertl, B. [et al.] Rapid molecular method for prenatal detection of Down’s syndrome / B. Pertl [et al.] // Lancet. – 1994. – Vol. 343. – P. 1197 – 1198.
8. Schmidt, W. [et al.] Detection of aneuploidy in chomosomes X, Y, 13, 18 and 21 by QF¬PCR in 662 selected pregnancies at risk / W. Schmidt [et al.] // Mol. Hum. Reprod. – 2000. – Vol. 6, № 9. – P. 855 – 860.